ຫຼັງຈາກ 25 ມື້ຂອງການບົ່ມເຊື້ອແບບຄົງທີ່ທີ່ 28°C, laccase ຈາກ *Pleurotus ostreatus* NRC620 ສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳສູງສຸດໃນສື່ກາງການເພາະເລี้ยงເຊື້ອລາ. ຄ່າ pH ແລະອຸນຫະພູມທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບເອນໄຊມ໌ນີ້ແມ່ນ 3.0 ແລະ 70°C ຕາມລຳດັບ. ຫຼັງຈາກການບົ່ມເຊື້ອເປັນເວລາ 2 ຊົ່ວໂມງທີ່ 40°C ແລະ 50°C, ກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ຍັງຄົງຢູ່ທີ່ 68.33% ແລະ 59.61% ຕາມລຳດັບ. ຫຼັງຈາກການບົ່ມເຊື້ອເປັນເວລາ 2 ຊົ່ວໂມງໃນບັຟເຟີ citrate-phosphate (pH 7.0), ກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ຍັງຄົງຢູ່ທີ່ 100%. ການເພີ່ມ 10 mM MgSO₄ ແລະ CuSO₄ ໄດ້ເພີ່ມກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ປະມານ 21% ແລະ 35% ຕາມລຳດັບ, ໃນຂະນະທີ່ NaCl, MnCl₂, KCl, ແລະ CaCl₂ ຍັບຍັ້ງກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌. ການໃຊ້ ABTS ເປັນສານຕັ້ງຕົ້ນ, ພາລາມິເຕີທາງຈลນະວິທະຍາ (Km ແລະ Vmax) ຂອງ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 laccase ແມ່ນ 1.99 mM ແລະ 16,217 μmol min−1 L−1, ຕາມລຳດັບ. ການປິ່ນປົວດ້ວຍເອນໄຊມ໌ຂອງຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກໂປມຫຼຸດຜ່ອນທັງ pH ແລະ ຄວາມໜືດຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ, ແລະ ການຫຼຸດລົງນີ້ກ່ຽວຂ້ອງກັບການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງເວລາເກັບຮັກສາ. ການປິ່ນປົວດ້ວຍ Laccase ເຮັດໃຫ້ປະລິມານ phenolic ທັງໝົດຂອງນ້ຳໝາກໂປມຫຼຸດລົງເລັກນ້ອຍ, ແຕ່ບໍ່ມີການຫຼຸດລົງຂອງກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະ.
ໃນຊຸມປີມໍ່ໆມານີ້, ນັກຄົ້ນຄວ້າໄດ້ສຸມໃສ່ການນຳໃຊ້ເຕັກໂນໂລຊີຊີວະພາບສີຂຽວໃນອຸດສາຫະກຳອາຫານ. ແລັກເຄສ ແມ່ນໜຶ່ງໃນເອນໄຊມ໌ທີ່ເປັນປະໂຫຍດທີ່ສຸດໃນອຸດສາຫະກຳອາຫານ, ໂດຍພົບເຫັນການນຳໃຊ້ໃນຂົງເຂດຕ່າງໆເຊັ່ນ: ການປຸງແຕ່ງນ້ຳໝາກໄມ້, ການອົບ, ການເຮັດໃຫ້ເຫຼົ້າແວງມີຄວາມໝັ້ນຄົງ, ແລະ ການປັບປຸງຄຸນນະພາບທາງກາຍະພາບຂອງຜະລິດຕະພັນອາຫານ.1ພືດຊັ້ນສູງ ແລະ ຈຸລິນຊີຫຼາຍຊະນິດຫຼั่งນ້ຳແລັກເຄສ2ແລະ ເຊື້ອເຫັດເຊັ່ນ: deuteromycetes, ascomycetes, ແລະ basidiomycetes ກໍ່ສາມາດຜະລິດ laccase ໄດ້.3Laccase (EC 1.10.3.2) ເປັນ blue oxidase ທີ່ຫຼຸດຜ່ອນໂມເລກຸນອົກຊີເຈນລົງໃນນໍ້າໂດຍໃຊ້ລະບົບທີ່ປະກອບດ້ວຍອະຕອມທອງແດງສາມອະຕອມທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງຜຸພັງສານປະກອບ phenolic ແລະ aromatic amines ຕ່າງໆ. ໃນລະຫວ່າງການຜະລິດນໍ້າໝາກໄມ້ ແລະ ຜັກ, ການເກີດສີນໍ້າຕານທາງ enzymatic ແລະ ບໍ່ແມ່ນ enzymatic ແມ່ນບັນຫາສໍາຄັນ.4ເນື່ອງຈາກສານເຫຼົ່ານີ້ສົ່ງຜົນກະທົບທາງລົບຕໍ່ສີ, ລົດຊາດ, ແລະກິ່ນຫອມຂອງນ້ຳໝາກໄມ້, ພວກມັນຕ້ອງຖືກກຳຈັດອອກ.5
ໃນບັນດາໝາກໄມ້ທຸກຊະນິດ, ໝາກໂປມແມ່ນໝາກໄມ້ທີ່ບໍລິໂພກຫຼາຍທີ່ສຸດໃນທົ່ວໂລກ ແລະ ໃນສະຫະພາບເອີຣົບ. ໃນປີ 2019, ການຜະລິດໝາກໂປມຢູ່ໃນອັນດັບທີສາມຂອງໂລກ, ເກີນ 87 ລ້ານໂຕນ.6ໝາກໂປມມີສານປະກອບ phenolic ຫຼາຍຊະນິດ, ລວມທັງ flavonoids ແລະກົດ phenolic ເຊັ່ນ: ກົດ caffeic ແລະກົດ chlorogenic.7ເນື່ອງຈາກວ່ານ້ຳໝາກໂປມມັກຖືກບໍລິໂພກໃນຮູບແບບໃສ, ປະມານ 50% ຫາ 90% ຂອງສ່ວນປະກອບຟີໂນລິກຈະສູນເສຍໄປໃນລະຫວ່າງຂະບວນການກັ່ນຕອງ.8ໃນປະຈຸບັນ, ຜູ້ບໍລິໂພກມັກເລືອກຜະລິດຕະພັນທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງໜ້ອຍທີ່ສຸດ, ເຊັ່ນ: ນ້ຳໝາກໂປມຂຸ່ນທີ່ມີປະລິມານໂພລີຟີນອນສູງ. ເຖິງຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ເນື່ອງຈາກມີປະລິມານຟີນອນສູງ, ນ້ຳໝາກໂປມປະເພດນີ້ຈຶ່ງມີຄວາມອ່ອນໄຫວຕໍ່ກັບການປ່ຽນສີ ແລະ ຮອຍດຳ.9ເຕັກໂນໂລຊີຕ່າງໆ, ລວມທັງວິທີການຮັກສາຄວາມຮ້ອນເຊັ່ນ: ການພາສເຕີໄຣເຊຊັນທີ່ອຸນຫະພູມ 60–90°C, ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນ ຫຼື ປ້ອງກັນການມີສີເຂັ້ມຂອງນ້ໍາໝາກໂປມ.10ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ອີງຕາມການຄົ້ນຄວ້າໂດຍ Sauceda-Gálvez11, ການປຸງແຕ່ງດ້ວຍຄວາມຮ້ອນສາມາດທຳລາຍສານເຄມີທີ່ລະເຫີຍໄດ້ ແລະ ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຄຸນນະພາບທາງກາຍະພາບຂອງນ້ຳໝາກໂປມ. ທາງເລືອກອື່ນນອກຈາກວິທີການປຸງແຕ່ງດ້ວຍຄວາມຮ້ອນປະກອບມີຄາບອນໄດອອກໄຊທີ່ວິກິດຫຼາຍ, ລັງສີອັນຕຣາໄວໂອເລັດ, ອັລຕຣາຊາວ, ຄວາມດັນໄຮໂດຣສະຖິດສູງ, ຫຼື ການເຮັດໃຫ້ເປັນເອກະພາບດ້ວຍຄວາມດັນສູງ.12ປະສິດທິພາບຂອງເຕັກໂນໂລຊີເຫຼົ່ານີ້ ແລະ ຜົນຜະລິດຂອງນ້ຳໝາກໄມ້ທີ່ເໝາະສົມແມ່ນຂຶ້ນກັບຕົວກຳນົດການນຳໃຊ້ ແລະ ລັກສະນະຂອງຜະລິດຕະພັນ. ການນຳໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງຂອງພວກມັນແມ່ນຖືກຈຳກັດໂດຍຄ່າໃຊ້ຈ່າຍສູງ, ຜົນກະທົບທາງລົບຕໍ່ຄຸນນະພາບຂອງຜະລິດຕະພັນອາຫານບາງຢ່າງ, ຫຼື ການບໍ່ເຮັດວຽກຂອງເອນໄຊທີ່ບໍ່ພຽງພໍ.13,14
ແລັກເຄສສາມາດໃຊ້ເພື່ອເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ມີຄວາມໝັ້ນຄົງ ແລະ ໃສຂຶ້ນ.15ກອກເມນ ແລະ ອື່ນໆ.16ແນະນຳໃຫ້ໃຊ້ laccase ສຳລັບການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ມີຄວາມໃສເພາະມັນສາມາດກຳຈັດສານປະກອບ phenolic ໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບໂດຍການປ່ຽນພວກມັນໃຫ້ເປັນໂພລີເມີ ຫຼື oligomers ທີ່ສາມາດກຳຈັດອອກໄດ້ງ່າຍດ້ວຍເຍື່ອ ultrafiltration ໃດກໍໄດ້, ຊ່ວຍໃຫ້ນ້ຳໝາກແອັບເປິ້ນຮັກສາສີ ແລະ ຄວາມໃສທີ່ໝັ້ນຄົງໄດ້ເຖິງຫົກອາທິດທີ່ອຸນຫະພູມ 50°C. laccase *Trichoderma* ທີ່ບໍລິສຸດໄດ້ຖືກตรึงໄວ້ໃນລູກປັດ alumina ແລະ ນຳໃຊ້ເພື່ອກຳຈັດສານປະກອບທີ່ບໍ່ມີລົດຊາດທີ່ເກີດຈາກການປົນເປື້ອນຂອງຈຸລິນຊີໃນນ້ຳໝາກແອັບເປິ້ນ.17
ປະມານ 80-90% ຂອງສ່ວນປະກອບທີ່ລະເຫີຍໄດ້ຂອງນ້ຳໝາກໂປມແມ່ນເອສເຕີ ແລະ ອານເດຮີ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໂປມມີກິ່ນຫອມທີ່ເປັນເອກະລັກ.18ນ້ຳໝາກໂປມຈາກ *Trametes versicolor* ໄດ້ຖືກຍຶດໄວ້ດ້ວຍວັດສະດຸທີ່ລາຄາບໍ່ແພງເຊິ່ງເຮັດຈາກເສັ້ນໄຍທຳມະຊາດຈາກເປືອກໝາກພ້າວອ່ອນເພື່ອຄວາມໃສຂອງນ້ຳໝາກໂປມ.19ການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ໄດ້ສືບສວນການສະຖຽນລະພາບຂອງນ້ຳໝາກໂປມ (ສີ ແລະ ຄວາມຂຸ່ນ) ໂດຍໃຊ້ວິທີການທີ່ບໍ່ມີເອນໄຊມ໌ ຫຼື ວິທີການເຮັດໃຫ້ເຄື່ອນທີ່ບໍ່ໄດ້, ຫຼື ຮ່ວມກັບການກອງດ້ວຍການກັ່ນຕອງແບບ ultrafiltration.5,19ເຖິງຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ຜົນກະທົບຂອງເຊື້ອລາ laccases ຈາກເຊື້ອລາຕໍ່ຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບແລະເຄມີຂອງນ້ຳໝາກໂປມໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາຍັງບໍ່ຈະແຈ້ງ. ດັ່ງນັ້ນ, ຈຸດປະສົງຂອງການສຶກສານີ້ແມ່ນເພື່ອສືບສວນການທົດລອງກ່ຽວກັບການປ່ຽນແປງຂອງຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບແລະເຄມີ, ປະລິມານສານປະກອບ phenolic, ແລະກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະຂອງນ້ຳໝາກໂປມຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍເຊື້ອລາ laccases ແລະການເກັບຮັກສາໃນຕູ້ເຢັນສອງອາທິດ. laccases ມີຄວາມສາມາດໃນການຜຸພັງສານປະກອບ phenolic, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ພວກມັນມີຄວາມຫວັງສຳລັບການນຳໃຊ້ໃນຂະບວນການອຸດສາຫະກຳຕ່າງໆ, ລວມທັງການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໂປມສະອາດ. ການສຶກສານີ້ໄດ້ກວດສອບ laccases ຈາກ *Pleurotus ostreatus* NRC 620, ໂດຍສຸມໃສ່ເງື່ອນໄຂທີ່ເໝາະສົມສຳລັບກິດຈະກຳແລະປະສິດທິພາບຂອງມັນໃນການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໂປມສະອາດ. ໃນຂະນະທີ່ການຄົ້ນຄວ້າກ່ຽວກັບເຫັດນາງລົມ (P. ostreatus NRC 620) ຍັງມີຂໍ້ຈຳກັດ, ການສຶກສາກ່ອນໜ້ານີ້ໄດ້ກວດສອບເອນໄຊມ໌ຈາກແຫຼ່ງເຊື້ອລາຕ່າງໆ, ເຊັ່ນ Trametes versicolor ແລະ Ganoderma lucidum. ຈຸດປະສົງຂອງການສຶກສານີ້ແມ່ນເພື່ອປະເມີນການນຳໃຊ້ທີ່ມີທ່າແຮງຂອງເອນໄຊມ໌ນີ້ໃນອຸດສາຫະກຳອາຫານ ແລະເນັ້ນໃສ່ຄຸນສົມບັດທີ່ເປັນເອກະລັກຂອງມັນ, ໂດຍສະເພາະແມ່ນ pH ແລະອຸນຫະພູມທີ່ເໝາະສົມຂອງມັນ.
2,2′-Azooxybis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) ໄດ້ຊື້ມາຈາກ Sigma-Aldrich (ການາດາ). ສານປະຕິກິລິຍາອື່ນໆທັງໝົດແມ່ນເກຣດວິເຄາະ.
ສູນເກັບກຳເຊື້ອຈຸລິນຊີຂອງສູນຄົ້ນຄວ້າແຫ່ງຊາດໄດ້ຮັບເຊື້ອເຫັດຫອຍນາງລົມ NRC620 ທີ່ຮູ້ຈັກ. ຫຼັງຈາກການເພາະເລี้ยงເຊື້ອ, ເຊື້ອນີ້ໄດ້ຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ໃນວຸ້ນມັນຕົ້ນ dextrose ທີ່ອຸນຫະພູມ 4°C. ວິທີການກະກຽມເຊື້ອແມ່ນດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້: ເຊື້ອເຫັດອາຍຸ 10 ມື້, ພັດທະນາເຕັມທີ່ໄດ້ຖືກເຊື້ອໃສ່ແຜ່ນວຸ້ນມັນຕົ້ນ dextrose ແລະ ບົ່ມທີ່ອຸນຫະພູມ 28°C. ຫຼັງຈາກ 10 ມື້, ບລັອກເຊື້ອເຫັດຂະໜາດເສັ້ນຜ່າສູນກາງ 12 ມມ ສາມອັນໄດ້ຖືກເອົາອອກຈາກສື່ວຸ້ນໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງເຈາະໂລຫະທີ່ປອດເຊື້ອ ແລະ ວາງໄວ້ໃນຂວດ Erlenmeyer ຂະໜາດ 250 ມລ ພ້ອມດ້ວຍປລັກຝ້າຍທີ່ມີສື່ວຸ້ນທີ່ຂ້າເຊື້ອແລ້ວ 50 ມລ (pH 5.0, ດັ່ງທີ່ໄດ້ອະທິບາຍໄວ້ກ່ອນໜ້ານີ້ໂດຍ Othman et al.20). ເຊື້ອເຫັດໄດ້ຖືກບົ່ມໄວ້ທີ່ອຸນຫະພູມ 28°C ເປັນເວລາ 18 ມື້. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ເຊື້ອເຫັດໄດ້ຖືກກັ່ນຕອງຜ່ານເຈ້ຍກອງ Whatman ໝາຍເລກ 1, ແລະນ້ຳເຊາະນ້ຳຕານທີ່ໄດ້ຮັບຈະເປັນແຫຼ່ງຂອງເອນໄຊ.
ກິດຈະກຳຂອງລັກເຄສໄດ້ຖືກກຳນົດໂດຍໃຊ້ ABTS ເປັນຊັ້ນຮອງ. ສ່ວນປະສົມປະຕິກິລິຍາ (2 mL) ປະກອບດ້ວຍ 500 μL ຂອງ ABTS 0.3 mM (ລະລາຍໃນບັຟເຟີ 0.1 M ໂຊດຽມຊິເຕຣດ, pH 4.5) ແລະຕົວຢ່າງເອນໄຊມ໌ໃນປະລິມານທີ່ຕ້ອງການທີ່ລະລາຍດ້ວຍນ້ຳກັ່ນ.21,22ໂດຍພິຈາລະນາວ່າ laccase ສາມາດຜຸພັງ ABTS ໄດ້ທີ່ອຸນຫະພູມຫ້ອງ (28 °C ± 2), ການຜຸພັງ ABTS ໄດ້ຖືກກໍານົດໂດຍການວັດແທກການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງການດູດຊຶມທີ່ 420 nm (ε420= 36,000 ຊມ-1 M -1) ໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກແສງ UV Agilent Carry-100. ຕ້ອງມີກິດຈະກຳ laccase ໜຶ່ງຫົວໜ່ວຍເພື່ອຜຸພັງ ABTS 1 μmol ຕໍ່ນາທີ. ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງໂປຣຕີນໄດ້ຖືກກຳນົດໂດຍວິທີ Bradford ໂດຍໃຊ້ bovine serum albumin ເປັນຕົວຄວບຄຸມພາຍໃນ.23,24
ຫຼັງຈາກໄດ້ຮັບເອນໄຊມ໌ຈາກເຊື້ອເຫັດນາງລົມ NRC 620, ກິດຈະກຳຂອງມັນໄດ້ຖືກວັດແທກໃນຊ່ວງເວລາການເພາະເລี้ยงທີ່ແຕກຕ່າງກັນເປັນເວລາ 25 ມື້ພາຍໃຕ້ສະພາບຄົງທີ່ທີ່ 28°C.
ເພື່ອສຶກສາຜົນກະທົບຂອງອຸນຫະພູມຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງ laccase, ການທົດລອງໄດ້ດຳເນີນໃນຊ່ວງອຸນຫະພູມຕັ້ງແຕ່ 20 ຫາ 90 °C. ກ່ອນທີ່ຈະເພີ່ມເອນໄຊມ໌ ແລະ ເລີ່ມປະຕິກິລິຍາ, ບັຟເຟີ (0.1 M sodium citrate, pH 4.5) ແລະ substrate (ABTS) ໄດ້ຖືກປະສົມເຂົ້າກັນ ແລະ ບົ່ມເປັນເວລາ 5 ນາທີ ທີ່ອຸນຫະພູມຕ່າງໆ. ຄວາມໝັ້ນຄົງທາງຄວາມຮ້ອນຂອງເອນໄຊມ໌ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍການບົ່ມໃນບັຟເຟີ 0.05 M sodium phosphate (pH 7.0) ທີ່ 40, 50, 60, ແລະ 70 °C ເປັນເວລາ 2 ຊົ່ວໂມງຕາມລຳດັບ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ກິດຈະກຳທີ່ເຫຼືອໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ substrate ABTS.
ຜົນກະທົບຂອງ pH ຕໍ່ກິດຈະກຳ laccase ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ ABTS ເປັນ substrate ໃນບັຟເຟີ citrate-phosphate 0.1 M ທີ່ມີລະດັບ pH 2.5 ຫາ 7.0. ສານລະລາຍຂອງ enzyme ໄດ້ຖືກບົ່ມຢູ່ທີ່ 40°C ເປັນເວລາສອງຊົ່ວໂມງໃນບັຟເຟີ citrate 0.1 M ແລະ Tris (pH 3, 4, 6, ແລະ 7) ເພື່ອປະເມີນຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງ pH. ກິດຈະກຳທີ່ເຫຼືອກັບ ABTS ເປັນ substrate ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ຫຼັງຈາກການບົ່ມ.
laccase ໄດ້ຖືກບົ່ມເປັນເວລາ 10 ນາທີໃນ sodium phosphate buffer (0.05 M, pH 7.0) ທີ່ມີໂລຫະໄອອອນຕ່າງໆ (Mg2+, Cu2+, Co2+, Ca2+, Zn2+, K+, Na+, ແລະ Mn2+) ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ 2.5 mM ແລະ 10 mM ຕາມລໍາດັບ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ການເພີ່ມ substrate (ABTS) ເພື່ອເລີ່ມຕົ້ນປະຕິກິລິຍາ, ແລະກິດຈະກໍາທີ່ກ່ຽວຂ້ອງໄດ້ຖືກປະເມີນ.
ການຜຸພັງ ABTS ໂດຍ laccase ທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່າງໆ (0.025–3 mM) ໄດ້ຖືກວັດແທກທີ່ pH 4.5 ເພື່ອກຳນົດພາລາມິເຕີ kinetic (Vmax ແລະ Km). kineticຄ່າຄົງທີ່ຂອງສົມຜົນ Michaelis-Menten ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ແຜນວາດ Lineweaver-Burk, ເຊິ່ງວາງແຜນສ່ວນກັບຂອງອັດຕາການເກີດປະຕິກິລິຍາເປັນຟັງຊັນຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງຊັບສະເຕຣດ. ຄ່າຄົງທີ່ຂອງການເຄື່ອນໄຫວໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ຈາກແຜນວາດ Lineweaver-Burk ໂດຍໃຊ້ຊອບແວ GraphPad Prism ເວີຊັນ 6.01.
ຫຼັງຈາກລ້າງໝາກໂປມຢ່າງລະອຽດດ້ວຍນ້ຳປະປາແລ້ວ, ພວກມັນຖືກຕັດເປັນສອງສ່ວນ ແລະ ຄັ້ນນ້ຳໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງຄັ້ນນ້ຳໝາກໂປມ Braun MP80 ແບບອັດຕະໂນມັດ (ຜະລິດຢູ່ປະເທດເຢຍລະມັນ). ນ້ຳໝາກໂປມໄດ້ຖືກກັ່ນຕອງຜ່ານຜ້າເຊັດໂຕສີ່ຊັ້ນ. ບໍ່ມີການເພີ່ມເອນໄຊມ໌ໃສ່ກຸ່ມຄວບຄຸມ, ໃນຂະນະທີ່ laccase 2.0% (ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງສຸດທີ່ທົດສອບ) ໄດ້ຖືກເພີ່ມໃສ່ນ້ຳໝາກໂປມທີ່ປຸງແຕ່ງສົດໆ, ເຊິ່ງຫຼັງຈາກນັ້ນເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ອຸນຫະພູມ 4°C ເປັນເວລາສອງອາທິດ.
ຄວາມເປັນກົດທີ່ສາມາດວັດແທກໄດ້ (TA) ແລະ pH ໄດ້ຖືກກໍານົດຕາມວິທີການຂອງ Boulton et al.ສະບັບທີ 27ຄ່າ pH ຂອງແຕ່ລະຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກວັດແທກໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກ pH ດິຈິຕອນ (ເຄື່ອງວັດແທກ pH JENWAY 3510). ຄວາມເປັນກົດທີ່ສາມາດວັດແທກໄດ້ (TA) ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍອີງໃສ່ກົດມາລິກໂດຍໃຊ້ສູດຕໍ່ໄປນີ້.
ບ່ອນທີ່ V ແລະ C ແມ່ນປະລິມານ (ມລ) ແລະ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ (0.1 ໂມລ/ລິດ) ຂອງສານລະລາຍໂຊດຽມໄຮດຣອກໄຊດ໌ທີ່ໃຊ້ໃນການໄຕເຕຣດຕາມລຳດັບ. K ແມ່ນສຳປະສິດການປ່ຽນກົດມາລິກ, ເທົ່າກັບ 0.067, ແລະ W ແມ່ນມວນສານ (ກຣາມ) ຂອງນ້ຳໝາກໂປມ.
ຂອງແຂງທີ່ລະລາຍທັງໝົດ (TDS) ເນື້ອໃນຂອງຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກໄມ້ທັງໝົດໄດ້ຖືກກຳນົດໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກການຫັກເຫຂອງແສງແບບພົກພາ PAL-1 (ATAGO, ໂຕກຽວ, ຍີ່ປຸ່ນ). ຫຼັງຈາກການວັດແທກແຕ່ລະຄັ້ງ, ເລນແສງໄດ້ຖືກລ້າງດ້ວຍນ້ຳທີ່ບໍ່ມີໄອອອນ, ແລະຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກແອັບເປິ້ນແຕ່ລະຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກທົດສອບສາມຄັ້ງ. ຄ່າສຳລັບແຕ່ລະຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍການຫາຄ່າສະເລ່ຍຂອງການວັດແທກທັງສາມຄັ້ງ. ຄ່າສະເລ່ຍ ± ຄ່າຜັນປ່ຽນມາດຕະຖານສຳລັບແຕ່ລະຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກແອັບເປິ້ນຍັງໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍການຫາຄ່າສະເລ່ຍຂອງຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້.
ຄວາມຍືດຫຍຸ່ນຂອງຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກໂປມໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກຄວາມໜຽວແບບໝູນວຽນ (RV, Rheotest 2, ເຢຍລະມັນ). ຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກວາງໄວ້ພາຍໃນກະບອກ “S2″ ຂອງເຄື່ອງວັດແທກຄວາມໜຽວ. ຄວາມໜຽວທີ່ປາກົດຂື້ນໄດ້ຖືກສະແດງໂດຍຄວາມຊັນຂອງເສັ້ນໂຄ້ງຄວາມກົດດັນຕໍ່ແຮງຕັດທຽບກັບເສັ້ນໂຄ້ງອັດຕາການຕັດ, ເຊິ່ງຄິດໄລ່ຈາກຄວາມກົດດັນຕໍ່ແຮງຕັດ ແລະ ເສັ້ນໂຄ້ງທີ່ສອດຄ້ອງກັນໃນອັດຕາການຕັດຕ່າງໆ (ຕັ້ງແຕ່ 1.00 ຫາ 437.4 s⁻¹). ສູດສຳລັບການຄິດໄລ່ຄວາມໜຽວທີ່ປາກົດຂື້ນແມ່ນດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
ບ່ອນທີ່ η ແມ່ນຄວາມໜືດທີ່ປາກົດ (cP), τ ແມ່ນຄວາມກົດດັນຂອງແຮງຕັດ (dyn/cm²), γ ແມ່ນອັດຕາການຕັດ (sec⁻¹), ແລະ (τ) ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ຄ່າແຮງບິດ (α) ແລະຄ່າກະບອກສູບ (Z) ໂດຍໃຊ້ສູດຕໍ່ໄປນີ້: τ = Z. α.
ດັດຊະນີສີນ້ຳຕານໄດ້ຖືກກໍານົດຕາມວິທີການຂອງ Meidav etສະບັບທີ 29ຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກໄມ້ 10 ມລ ໄດ້ຖືກປั่นແຍກທີ່ 2750 xg ເປັນເວລາ 10 ນາທີ. ນ້ຳຊອດສ່ວນເກີນ 5 ມລ ໄດ້ຖືກປະສົມກັບເອທານອນ 95% 5 ມລ. ການດູດຊຶມຂອງສ່ວນປະສົມໄດ້ຖືກວັດແທກທີ່ 420 nm ໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກແສງ Shimadzu UV (UV-1601 PC).
ປະລິມານຟີນໍລິກທັງໝົດ (TPC) ໄດ້ຖືກກໍານົດດ້ວຍວິທີການວັດແທກສີໂດຍໃຊ້ຕົວເຮັດປະຕິກິລິຍາ Folin-Ciocalteu ດັ່ງທີ່ໄດ້ອະທິບາຍໂດຍ Boulton et al.[27]]. ເສັ້ນໂຄ້ງມາດຕະຖານຂອງກົດ gallic ໄດ້ຖືກສ້າງຂຶ້ນສຳລັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕັ້ງແຕ່ 0 ຫາ 500 ມກ/ລິດ (r²= 0.997). ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນສະແດງເປັນອາຊິດ gallic ທຽບເທົ່າ (ມກ GAE/ມລ).
ຕື່ມນ້ຳກັ່ນ 125 μL ແລະ ສານລະລາຍ FRAP 2850 μL ໃສ່ນ້ຳໝາກໂປມ 25 μL ແລະ ປະສ່ວນປະສົມໄວ້ໃນບ່ອນມືດເປັນເວລາ30ນາທີ. ຈາກນັ້ນວັດແທກການດູດຊຶມທີ່ 593 nm ໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກແສງ Shimadzu UV (UV-1601 PC). ນ້ຳຢາ FRAP ໄດ້ຖືກກະກຽມໂດຍການປະສົມບັຟເຟີອາເຊເຕດ 300 mM (pH 3.6), ທາດເຫຼັກ (III) ຄລໍໄຣດ໌ 20 mM, ແລະ 2,4,6-tris(2-pyridyl)triazine (TPTZ) 10 mM (ລະລາຍໃນ 40 mM HCl) ໃນອັດຕາສ່ວນ 10:1:1. ເສັ້ນໂຄ້ງມາດຕະຖານໄດ້ຖືກສ້າງຂຶ້ນໂດຍໃຊ້ Trolox ເປັນມາດຕະຖານ (R²= 0.999), ແລະຜົນໄດ້ຮັບສະແດງອອກເປັນ μM Trolox/mL.
ກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະຂອງນ້ຳໝາກໄມ້ທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ ແລະ ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວໄດ້ຖືກກຳນົດໂດຍໃຊ້ວິທີ DPPH ເພື່ອປະເມີນຄວາມສາມາດຂອງມັນໃນການກຳຈັດອະນຸມູນອິດສະລະ DPPH.31ນ້ຳໝາກໄມ້ສິບໄມໂຄຣລິດຖືກປະສົມກັບສານລະລາຍ DPPH 1 ມລ (100 μM) ໃນເມທານອນ. ຫຼັງຈາກປະຕິກິລິຍາໃນຄວາມມືດເປັນເວລາ 30 ນາທີ, ການດູດຊຶມຂອງສ່ວນປະສົມໄດ້ຖືກວັດແທກຢູ່ທີ່ 517 nm ໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກແສງ UV Shimadzu (UV-1601 PC). ຜົນໄດ້ຮັບໄດ້ຖືກສະແດງເປັນຄ່າທຽບເທົ່າ trolox (μM trolox/ml) ໂດຍອີງໃສ່ເສັ້ນໂຄ້ງການປັບທຽບ (R2= 0.990).
ຂໍ້ມູນທີ່ໄດ້ຮັບສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການຜະລິດລັກເຄສສູງສຸດໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນໃນເຫັດນາງລົມ NRC 620 ໃນຕອນທ້າຍຂອງມື້ໝັກທີ 18, ເຊິ່ງບັນລຸກິດຈະກຳ 1302 U/L. ນີ້ເປັນພື້ນຖານໃນການກຳນົດເວລາການປູກທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບການຜະລິດລັກເຄສ (ຮູບທີ 1). ເຖິງແມ່ນວ່າການຜະລິດເອນໄຊມ໌ຈະເພີ່ມຂຶ້ນຕາມເວລາການປູກທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນ, ແຕ່ອັດຕາການເພີ່ມຂຶ້ນບໍ່ໄດ້ສັດສ່ວນໂດຍກົງກັບເວລາການປູກ; ຫຼັງຈາກ 21 ມື້, ກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ໄດ້ເພີ່ມຂຶ້ນພຽງແຕ່ 90 U/L (ເປັນ 1390 U/L). ດັ່ງນັ້ນ, ໃນທີ່ສຸດ, 18 ມື້ໄດ້ຖືກເລືອກເປັນເວລາການປູກທີ່ດີທີ່ສຸດເພື່ອດຸ່ນດ່ຽງຜົນຜະລິດຜະລິດຕະພັນກັບຜົນປະໂຫຍດທາງເສດຖະກິດຂອງເວລາການປູກທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນ.
ຜົນກະທົບຂອງເວລາການປູກຝັງຕໍ່ຜົນຜະລິດຂອງເຊື້ອລາໃນ Pleurotus ostreatus NRC 620. ບລັອກເຊື້ອລາສາມກ້ອນ (12 ມມ) ໄດ້ຖືກສັກເຂົ້າໄປໃນສື່ກາງທີ່ປອດເຊື້ອ 50 ມລ ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນเพาะเลี้ยงທີ່ 28 °C ສໍາລັບເວລາທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.
ສອດຄ່ອງກັບການສຶກສາອື່ນໆ, ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າໄລຍະເວລາການເພາະເລี้ยงທີ່ເໝາະສົມເພື່ອບັນລຸການຫຼั่ง laccase ສູງສຸດໂດຍເຊື້ອເຫັດອາດຈະຢູ່ລະຫວ່າງ 7 ຫາ 36 ມື້.32ອີງຕາມ Ezike ແລະ ຄະນະ.33, *Trametes polyzona* WRF03 ຜະລິດ laccase ໃນປະລິມານສູງສຸດໃນຕອນທ້າຍຂອງມື້ທີເກົ້າຂອງການໝັກ, ໂດຍມີກິດຈະກຳສະເພາະຂອງໂປຣຕີນ 1637 U/mg. ນອກຈາກນັ້ນ, Othman ແລະ ຄະນະ.34ພົບວ່າ *Trichoderma harzianum* S7113 ໄດ້ປ່ອຍ laccase ອອກມາເປັນຈຳນວນຫຼວງຫຼາຍໃນມື້ທີຫ້າຂອງການເພາະເລี้ยง. ອັດຕາການຜະລິດ laccase ໄດ້ບັນລຸເຖິງຈຸດສູງສຸດໃນມື້ທີສິບສີ່ ແລະ ຫຼັງຈາກນັ້ນກໍ່ຄ່ອຍໆຫຼຸດລົງ.34ເຖິງແມ່ນວ່າການຫຼั่งເອນໄຊມ໌ຍັງສາມາດເກີດຂຶ້ນໄດ້ໃນໄລຍະການເຕີບໂຕຫຼັກ, ແຕ່ມັນມັກຈະສູງສຸດໃນໄລຍະກາງ ແລະ ຖືກກະຕຸ້ນໂດຍການບໍລິໂພກແຫຼ່ງຄາບອນ ຫຼື ໄນໂຕຣເຈນ.34,35
ເຖິງແມ່ນວ່າ laccase ຈາກ Pleurotus ostreatus NRC 620 ໄດ້ສະແດງກິດຈະກຳສູງໃນຊ່ວງອຸນຫະພູມທີ່ກວ້າງຂວາງຕັ້ງແຕ່ 50°C ຫາ 80°C, ເຊິ່ງໃກ້ຈະຮອດຈຸດສູງສຸດ (69–98%), ແຕ່ກິດຈະກຳສູງສຸດຂອງມັນຖືກສັງເກດເຫັນຢູ່ທີ່ 70°C (ຮູບທີ 2a). ນອກຂອບເຂດອຸນຫະພູມນີ້, ກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ຫຼຸດລົງປະມານ 70°C. ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າເອນໄຊມ໌ມີກິດຈະກຳຢູ່ທີ່ອຸນຫະພູມສູງ, ອາດຈະເປັນຍ້ອນວ່າອຸນຫະພູມສູງເພີ່ມພະລັງງານຈົນຂອງປະຕິກິລິຍາ.
ຜົນກະທົບຂອງອຸນຫະພູມປະຕິກິລິຍາ (a) ແລະ pH (b) ຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງ laccase ໃນ *Pleurotus ostreatus* NRC 620. ອຸນຫະພູມຕັ້ງແຕ່ 20 ຫາ 90 °C ໄດ້ບັນລຸໄດ້ໂດຍການບົ່ມສ່ວນປະສົມລ່ວງໜ້າໃນອຸນຫະພູມທີ່ແຕກຕ່າງກັນເປັນເວລາ 5 ນາທີກ່ອນທີ່ຈະເພີ່ມເອນໄຊມ໌ ແລະ ເລີ່ມປະຕິກິລິຍາ. ຜົນກະທົບຂອງ pH ຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງ laccase ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍໃຊ້ ABTS ເປັນສານຕັ້ງຕົ້ນໃນສານລະລາຍທີ່ມີບັຟເຟີ citrate-phosphate 0.1 M ໃນຊ່ວງ pH 2.5 ຫາ 7.0.
ອີງຕາມ Ezike ແລະເອກະສານທີ 33, ອຸນຫະພູມທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບ *Trametes polyzona* WRF03 laccase ແມ່ນ 55 °C, ເຊິ່ງຄືກັນກັບ *Ganoderma lucidum*.laccase36ແລະ ຄ້າຍຄືກັບອຸນຫະພູມທີ່ດີທີ່ສຸດ (50 °C) ສຳລັບ *Trametes polyzona* KU-RNW02737ແລັກເຄສ . ບາວດຣຽນ38ສັງເກດເຫັນວ່າ, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບລະບົບເອນໄຊທີ່ທຳລາຍລີກນິນອື່ນໆ, ລະດັບອຸນຫະພູມທີ່ເໝາະສົມສຳລັບ laccase ແມ່ນຢູ່ລະຫວ່າງ 50 ແລະ 70 °C.
ຜົນໄດ້ຮັບສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າເອນໄຊມ໌ສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳສູງສຸດທີ່ pH 3.0, ເຊິ່ງບັນລຸກິດຈະກຳ 94% ທີ່ pH 3.5. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ມັນຍັງຄົງມີການເຄື່ອນໄຫວໃນຊ່ວງ pH ທີ່ກວ້າງຕັ້ງແຕ່ 2.5 ຫາ 7.0 (ຮູບທີ 2b). ນອກຈາກນັ້ນ, ມັນສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳສູງກວ່າໃນສະພາບທີ່ເປັນກົດເມື່ອທຽບກັບສະພາບທີ່ເປັນກາງ ຫຼື ເປັນດ່າງ. ກິດຈະກຳຂອງມັນຍັງຄົງຢ່າງໜ້ອຍ 77% ໃນຊ່ວງ pH ຕັ້ງແຕ່ 2.5 ຫາ 4.5, ແຕ່ບັນລຸພຽງແຕ່ປະມານ 38% ທີ່ pH 7.0. pH ທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບ laccase ຈາກ *Trametes polyzona* WRF03 ແມ່ນ 4.533, ເຊິ່ງຄືກັນກັບ pH ສຳລັບ laccase ຈາກ *Trametes polyzona* KU-RNW02737, *Trichoderma harzanium* 39, *Pleurotus* sp. 40, ແລະ *Trametes hirsuta* 41. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ອີງຕາມການສຶກສາໂດຍ Chairin et al.42, pH ທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບ laccase ຈາກ *Polymorpha f. sp.* WR710-1 ແມ່ນ 2.2, ໃນຂະນະທີ່ pH ທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບ laccase ຈາກ *Polymorpha f. sp.* IBL-04 ແມ່ນ 5.043. ການຜູກມັດຂອງ anions hydroxide (ຕົວຍັບຍັ້ງ laccase) ກັບອະຕອມທອງແດງຂອງ laccase T2/T3 ອາດເປັນສາເຫດຂອງກິດຈະກຳ laccase ທີ່ຫຼຸດລົງພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂ pH ທີ່ເປັນກາງ ຫຼື ເປັນດ່າງ. ສິ່ງນີ້ອາດຈະລົບກວນການໂອນເອເລັກຕຣອນພາຍໃນຈາກສູນກາງ T1 ໄປຫາສູນກາງ T2/T3, ດັ່ງນັ້ນຈຳກັດກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ 23,44
ໂດຍການບົ່ມເຊື້ອເອນໄຊມ໌ໃນອຸນຫະພູມທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ພົບວ່າທັງເວລາບົ່ມເຊື້ອ ແລະ ອຸນຫະພູມມີຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງເອນໄຊມ໌. ສິ່ງທີ່ໜ້າສັງເກດຄື laccase ຈາກ *Trametes polyzona* NRC 620 ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໝັ້ນຄົງສູງກວ່າທີ່ 40℃ ແລະ 50℃, ໂດຍຮັກສາກິດຈະກຳເບື້ອງຕົ້ນໄວ້ໄດ້ 68.33% ແລະ 59.61% ຕາມລຳດັບ, ຫຼັງຈາກ 120 ນາທີ (ຮູບທີ 3a). ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂດຽວກັນ (40℃ ແລະ 50℃, 120 ນາທີ), laccase ຈາກ *Trametes polyzona* WRF03 ຮັກສາກິດຈະກຳໄວ້ໄດ້ 64.38% ແລະ 42.92% ຕາມລຳດັບ.33ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ການເພີ່ມເວລາ ແລະ ອຸນຫະພູມໃນການຟັກຕົວເຮັດໃຫ້ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງ *Trametes polyzona* NRC 620 laccase ຫຼຸດລົງ; ຫຼັງຈາກການຟັກຕົວທີ່ 60℃ ແລະ 70℃ ເປັນເວລາ 60 ນາທີ, ກິດຈະກຳຂອງມັນຫຼຸດລົງເປັນ 39.24% ແລະ 1.72% ຕາມລຳດັບ (ຮູບທີ 3a). ສອດຄ່ອງກັບຜົນການທົດລອງ, laccase ຈາກ *Trametes polyzona* WRF03 ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໝັ້ນຄົງສູງຂຶ້ນທີ່ 40 ແລະ 50℃ ຕະຫຼອດຂະບວນການຮັກສາຄວາມຮ້ອນ.33ເຊັ່ນດຽວກັນ, ເຫຼືອງຈະເລີນກິດ ແລະມາດຕາ 37ແລະ Chairin ແລະສະບັບທີ 42ໄດ້ລາຍງານຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງ laccases ຈາກ Trametes polyzona KURNW027 ແລະ Trametes polyzona WR710-1 ທີ່ອຸນຫະພູມ 50 °C ເປັນເວລາ 1 ຊົ່ວໂມງຕາມລຳດັບ. ໃນຖານະເປັນຕົວເລັ່ງປະຕິກິລິຍາທາງຊີວະພາບທີ່ເປັນປະໂຫຍດທີ່ນຳໃຊ້ໄດ້ໃນຂົງເຂດຊີວະເຕັກໂນໂລຊີຕ່າງໆ, laccase ຄວນມີຄວາມໝັ້ນຄົງ ແລະ ປະສິດທິພາບທີ່ດີໃນລະດັບອຸນຫະພູມທີ່ກວ້າງຂວາງ.
ຄວາມໝັ້ນຄົງທາງອຸນຫະພູມ (a) ແລະ ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງ pH (b) ຂອງ laccase ຈາກ *Pleurotus ostreatus* NRC 620. ຄວາມໝັ້ນຄົງທາງອຸນຫະພູມໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍການບົ່ມສານລະລາຍຂອງເອນໄຊມ໌ໃນບັຟເຟີໂຊດຽມຟອສເຟດ 0.05 M (pH 7.0) ທີ່ 40, 50, 60, ແລະ 70 °C ເປັນເວລາ 2 ຊົ່ວໂມງຕາມລຳດັບ. ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງ pH ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍການບົ່ມສານລະລາຍຂອງເອນໄຊມ໌ໃນບັຟເຟີຊິເຕຣດ 0.1 M ແລະບັຟເຟີ Tris (pH 3, 4, 6, ແລະ 7) ທີ່ 40 °C ເປັນເວລາ 2 ຊົ່ວໂມງ. ກິດຈະກຳທີ່ເຫຼືອໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ ABTS ເປັນສານຕັ້ງຕົ້ນຫຼັງຈາກການບົ່ມ.
ເພື່ອກຳນົດເງື່ອນໄຂທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບການໃຊ້ ແລະ ການເກັບຮັກສາເອນໄຊມ໌, ພວກເຮົາໄດ້ສືບສວນຜົນກະທົບຂອງ pH ຕໍ່ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງ laccase. ການສຳຜັດກັບຄ່າ pH ທີ່ແຕກຕ່າງກັນມີຜົນກະທົບຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຕໍ່ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງໂຄງສ້າງໂປຣຕີນ, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງມີອິດທິພົນຕໍ່ຄວາມໝັ້ນຄົງ ແລະ ກິດຈະກຳຂອງໂມເລກຸນເອນໄຊມ໌. ຜົນໄດ້ຮັບສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າເອນໄຊມ໌ມີຄວາມໝັ້ນຄົງໜ້ອຍລົງພາຍໃຕ້ສະພາບທີ່ເປັນກົດ, ໃນຂະນະທີ່ມັນສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໝັ້ນຄົງທີ່ດີກວ່າທີ່ຄ່າ pH ສູງກວ່າ (ພາກພື້ນທີ່ເປັນກາງ ແລະ ເປັນດ່າງ). ທີ່ຄ່າ pH 7.0, 6.0, 4.0, ແລະ 3.0, ອັດຕາການຮັກສາເອນໄຊມ໌ຫຼັງຈາກ 120 ນາທີແມ່ນປະມານ 100%, 62.54%, 52.39%, ແລະ 11.14%, ຕາມລຳດັບ (ຮູບທີ 3b). *Strombus multisus* WRF03 laccase ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມໝັ້ນຄົງສູງຂຶ້ນທີ່ຄ່າ pH ເປັນກາງ (5.5–6.5) ແລະ ຄວາມໝັ້ນຄົງຕ່ຳລົງທີ່ຄ່າ pH ເປັນກົດ (ຕ່ຳກວ່າ 4.0). ຫຼັງຈາກ 120 ນາທີ ທີ່ຄ່າ pH 5.5, 6.0, ແລະ 6.5, ອັດຕາການຮັກສາເອນໄຊມ໌ແມ່ນປະມານ 82%, 100%, ແລະ 93% ຕາມລຳດັບ.33ໄຄຣິນ ແລະ ອື່ນໆ.42ສັງເກດເຫັນວ່າ laccase ຈາກ Trametes polyzona WR710-1 ມີຄວາມໝັ້ນຄົງໃນລະດັບ pH 6.0 ຫາ 7.0, ໃນຂະນະທີ່ Sayed et al.45ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ laccase ມີຄວາມໝັ້ນຄົງຫຼາຍກວ່າພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂ pH ທີ່ເປັນກາງ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, laccase ຈາກ Cerrena unicolor ຍັງສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໝັ້ນຄົງພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂດ່າງ (pH 9.0)46ທາດ laccases ທີ່ໄດ້ສຶກສາສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໝັ້ນຄົງສູງໃນຊ່ວງ pH ທີ່ກວ້າງຂວາງ. ນີ້ອາດເປັນລັກສະນະທີ່ສຳຄັນສຳລັບການນຳໃຊ້ໃນອຸດສາຫະກຳ.
ເນື່ອງຈາກໄອອອນໂລຫະບາງຊະນິດມີຜົນກະທົບທັງການກະຕຸ້ນ ແລະ ຍັບຍັ້ງຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌, ຜົນກະທົບຂອງມັນຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ຈຶ່ງຕ້ອງໄດ້ຮັບການພິຈາລະນາໃນການນຳໃຊ້ໃນອຸດສາຫະກຳ. ນີ້ແມ່ນສິ່ງສຳຄັນເພາະວ່າໄອອອນໂລຫະເປັນສິ່ງປົນເປື້ອນສິ່ງແວດລ້ອມທົ່ວໄປທີ່ສາມາດສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມໝັ້ນຄົງ ແລະ ການສັງເຄາະຂອງເອນໄຊມ໌ນອກຈຸລັງ.47ເພື່ອສືບສວນຜົນກະທົບຂອງໂລຫະປະສົມຫຼາຍຊະນິດຕໍ່ laccase ຈາກ *Pleurotus ostreatus* NRC 620, ພວກເຮົາໄດ້ດໍາເນີນການທົດລອງທີ່ສອດຄ້ອງກັນ. ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 4, ຂຶ້ນກັບປະເພດຂອງໂລຫະທີ່ໃຊ້, ການເພີ່ມຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງໂລຫະປະສົມຈາກ 2.5 mM ເປັນ 10 mM ສົ່ງຜົນກະທົບທາງລົບຕໍ່ການເຮັດວຽກຂອງ enzyme. ຕົວຢ່າງ,ມກ²⁺ , Co²⁺ , Zn²⁺, ແລະCu²⁺ສາມາດກະຕຸ້ນ ແລະ ກະຕຸ້ນກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ໄດ້, ໃນຂະນະທີ່Na⁺ , Mn²⁺ , Ca²⁺, ແລະK⁺ສາມາດຍັບຍັ້ງກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ໄດ້. ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ 10 mM, ໄອອອນ Cu²⁺ ແລະ Mg²⁺ ແມ່ນຕົວກະຕຸ້ນທີ່ມີປະສິດທິພາບທີ່ສຸດຂອງກິດຈະກຳ laccase ຈາກ *Pleurotus ostreatus* NRC 620, ເຊິ່ງໃຫ້ລະດັບການກະຕຸ້ນປະມານ 34% ແລະ 20% ຕາມລຳດັບ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ 10 mM, ໄອອອນ Ca²⁺ ແມ່ນຕົວຍັບຍັ້ງທີ່ມີປະສິດທິພາບທີ່ສຸດຂອງ laccase, ເຊິ່ງຫຼຸດຜ່ອນກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ປະມານ 60%.
ຜົນກະທົບຂອງໄອອອນໂລຫະຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງ Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase. laccase ໄດ້ຖືກບົ່ມເປັນເວລາ 10 ນາທີໃນບັຟເຟີໂຊດຽມຟອສເຟດ (0.05 M, pH 7.0) ທີ່ມີໄອອອນໂລຫະຕ່າງໆທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ 2.5 mM ແລະ 10 mM. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ປະຕິກິລິຍາໄດ້ເລີ່ມຕົ້ນໂດຍການເພີ່ມຊັບສະເຕຣດ (ABTS), ຫຼັງຈາກນັ້ນກິດຈະກຳທີ່ກ່ຽວຂ້ອງໄດ້ຖືກວັດແທກ.
ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາແມ່ນສອດຄ່ອງກັບຜົນຂອງຜູ້ຂຽນຄົນອື່ນໆທີ່ພົບວ່າ Mg²⁺ ແລະ Cu²⁺ ເສີມຂະຫຍາຍກິດຈະກຳຂອງ *Trametes polyzona* WRF03³. Castaño ແລະ ຄະນະ⁴⁸ ພົບວ່າ laccase ຈາກ *Xylaria* sp. ຖືກກະຕຸ້ນໃນລະດັບໜຶ່ງໂດຍໄອອອນທອງແດງ (Cu²⁺). ນອກຈາກນັ້ນ, Foroutanfar ແລະ ຄະນະ⁴⁹ ແລະ Si ແລະ ຄະນະ⁵⁰ ໄດ້ດຳເນີນການສຶກສາທີ່ຄ້າຍຄືກັນກ່ຽວກັບ laccases ຈາກ *Paraconiothyrium variabile* ແລະ *Trametes pubescens* ຕາມລຳດັບ. ສະຖານທີ່ຜູກມັດທອງແດງປະເພດ II (T2) ຂອງເອນໄຊມ໌ນີ້ສາມາດອີ່ມຕົວດ້ວຍ Cu²⁺ ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ກຳນົດໃຫ້, ເຊິ່ງອາດຈະອະທິບາຍການກະຕຸ້ນກິດຈະກຳຂອງ laccase ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ Cu²⁺³⁹ ທີ່ສູງຂຶ້ນ. ເນື່ອງຈາກເຊື້ອລາເນົ່າເປື່ອຍຂາວ laccases ແມ່ນ oxidases ທີ່ມີອະຕອມທອງແດງຫຼາຍອັນ, ຜົນກະທົບຂອງໄອອອນທອງແດງຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງ laccase ຈຶ່ງມີຄວາມຫຼາກຫຼາຍ ແລະ ມີຕັ້ງແຕ່ການກະຕຸ້ນ ແລະ ຍັບຍັ້ງ ຈົນເຖິງຄວາມເປັນກາງ.⁵¹ ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, Zhou ແລະ ຄະນະ. [52]ລາຍງານວ່າCu²⁺ຍັບຍັ້ງກິດຈະກຳ laccase ຂອງປວກໃຕ້ດິນໄຕ້ຫວັນ (Odontotermes formosanus). ຢ່າງໃດກໍຕາມ, laccases ຂອງ Cerena sp. HYB07[53]ແລະ Clitocybe maxima[54]ບໍ່ໄດ້ຮັບຜົນກະທົບຈາກໄອອອນທອງແດງ.
ຄວາມຈຳເພາະຂອງຊັບສະເຕຣດໄດ້ຖືກສະແດງໂດຍຕົວກໍານົດການຈลນະວິທະຍາຂອງມັນ (Km ແລະ Vmax); ຄວາມຜູກພັນຂອງຊັບສະເຕຣດກັບເອນໄຊມ໌ທີ່ແຂງແຮງເທົ່າໃດ, ຄ່າ Km ຕ່ໍາລົງ ແລະ ຄວາມຈຳເພາະຂອງຊັບສະເຕຣດສູງຂຶ້ນ.3, 21, 55ພາລາມິເຕີ kinetic (Km ແລະ Vmax) ຂອງ laccase ຈາກ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ໄດ້ຖືກກຳນົດໂດຍໃຊ້ຊອບແວ GraphPad Prism 6.0 ໂດຍການວາງແຜນ Lineweaver-Burk (ຮູບທີ 5). ເມື່ອໃຊ້ ABTS ເປັນ substrate, ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນ 1.99 mM ແລະ 16217 μmolນາທີ⁻¹ ລ⁻¹,ຕາມລຳດັບ. Elsayed ແລະ ຄະນະ.21ໄດ້ລາຍງານວ່າຄ່າ Km ສຳລັບການຜຸພັງ ABTS ແມ່ນ 0.1 mM ແລະ 0.064 mM ຕາມລຳດັບ, ຊີ້ບອກເຖິງຄວາມຜູກພັນສູງຂອງ isoenzymes Lac A ແລະ Lac B ສຳລັບ ABTS. ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ຄ່າ Vmax ແມ່ນ 0.182 μmolນາທີ⁻¹ແລະ 0.603 ໄມໂຄຣໂມລນາທີ⁻¹, ຕາມລຳດັບ. ຄ່າ Km ທີ່ໄດ້ຮັບແມ່ນຕ່ຳກວ່າຂອງ Trametes polyzona WRF03 (8.66 mM); ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ຄ່າ Vmax ຂອງພວກມັນ (1429 mmol min⁻¹) ກໍ່ຕ່ຳກວ່າເມື່ອໃຊ້ ABTS ເປັນ substrate.33 ໃນລັກສະນະດຽວກັນ, ຄ່າ Km ຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ laccase Lentinus squarrosulus MR13 ແລະ Trametes sp. AH28-2 ແມ່ນ 0.0714 mM ແລະ 0.025 mM ຕາມລໍາດັບ, ແລະຄ່າ Vmax ແມ່ນ 0.0091 mM min−1 ແລະ 0.67 mM min−1 mg−1 (ທຽບກັບ ABTS), ຕາມລຳດັບ.56,57
ຜົນກະທົບຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ ABTS ຕໍ່ກິດຈະກຳຂອງ laccase ຈາກ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ໄດ້ຖືກສືບສວນ, ແລະ ໄດ້ວາງແຜນ Lineweaver-Burk ຂອງສ່ວນກັບຂອງຄວາມໄວປະຕິກິລິຍາເບື້ອງຕົ້ນທຽບກັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ ABTS. ປະຕິກິລິຍາອົກຊີເດຊັນຂອງ ABTS ທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ (0.025–3.0 mM) ຂອງ laccase ໄດ້ຖືກວັດແທກທີ່ pH 4.5 ເພື່ອກຳນົດພາລາມິເຕີ kinetic (Vmax ແລະ Km). ຄ່າຄົງທີ່ kinetic ຂອງ Michaelis-Menten ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ຕາຕະລາງ Lineweaver-Burk ຂອງສ່ວນກັບຂອງຄວາມໄວປະຕິກິລິຍາທຽບກັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ substrates. ຄ່າຄົງທີ່ kinetic ໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ຈາກຕາຕະລາງ Lineweaver-Burk ໂດຍໃຊ້ຊອບແວ GraphPad Prism 6.01.
ເອນໄຊມ໌ທີ່ເຮັດໃຫ້ກະຈ່າງໃສແບບດັ້ງເດີມ, ເຊັ່ນ: ເພັກຕິກເນສ, ໄຮໂດຣໄລສສານເພັກຕິກ, ຫຼຸດຜ່ອນຄວາມໜືດ ແລະ ຄວາມຂຸ່ນ. ພວກມັນທຳລາຍໂພລີແຊກຄາໄຣດ໌ໂຄງສ້າງໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ ແລະ ມັກຖືກໃຊ້ຮ່ວມກັບເອນໄຊມ໌ອື່ນໆ, ເຊັ່ນ: ເຊວລູເລສ ແລະ ເຮມິເຊວລູເລສ, ເພື່ອປັບປຸງຜົນຜະລິດ ແລະ ຄວາມກະຈ່າງໃສ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເພັກຕິກເນສບໍ່ໄດ້ແນໃສ່ສານປະກອບຟີນໍລິກໂດຍສະເພາະ, ເຊິ່ງເປັນຕົວປະກອບສ່ວນຫຼັກຂອງຄວາມຂຸ່ນ ແລະ ການເກີດສີນ້ຳຕານອົກຊີເດຊັນ, ໂດຍສະເພາະໃນນ້ຳໝາກໄມ້ເຊັ່ນ: ນ້ຳໝາກໂປມ ແລະ ນ້ຳອະງຸ່ນ.58ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, laccases ເປັນຕົວກະຕຸ້ນການຜຸພັງຂອງສານປະກອບ phenolic, ໂດຍການປະສົມ polymerizing ພວກມັນໃຫ້ເປັນໂມເລກຸນທີ່ໃຫຍ່ກວ່າ, ບໍ່ລະລາຍ ເຊິ່ງສາມາດກຳຈັດອອກໄດ້ໂດຍການຕົກຕະກອນ ຫຼື ການກັ່ນຕອງ. ກົນໄກນີ້ບໍ່ພຽງແຕ່ປັບປຸງຄວາມແຈ່ມແຈ້ງເທົ່ານັ້ນ ແຕ່ຍັງຊ່ວຍຍືດອາຍຸການເກັບຮັກສາຂອງນ້ຳໝາກໄມ້ໂດຍການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງການເກີດສີນ້ຳຕານອົກຊີເດຊັນທີ່ເກີດຈາກສານປະກອບ phenolic. ນອກຈາກນັ້ນ, ຂະບວນການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ມີຄວາມແຈ່ມແຈ້ງໂດຍອີງໃສ່ laccase ສາມາດປະຕິບັດໄດ້ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການປຸງແຕ່ງທີ່ອ່ອນໂຍນ (pH 3.5–5.5, ອຸນຫະພູມ 25–40 °C), ເຮັດໃຫ້ພວກມັນເໝາະສົມກັບນ້ຳໝາກໄມ້ທີ່ລະອຽດອ່ອນໂດຍບໍ່ມີການທຳລາຍຄຸນສົມບັດທາງໂພຊະນາການ ຫຼື ອະໄວຍະວະຂອງມັນ.59ການສຶກສາໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວດ້ວຍ pectinase ສາມາດເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ໃສໄດ້ພາຍໃນ 1-2 ຊົ່ວໂມງ, ໃນຂະນະທີ່ການປິ່ນປົວດ້ວຍ laccase ໂດຍປົກກະຕິແລ້ວຕ້ອງໃຊ້ເວລາປະຕິກິລິຍາດົນກວ່າ (3-6 ຊົ່ວໂມງ) ເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນສານປະກອບ phenolic ໄດ້ຢ່າງສົມບູນ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຂະບວນການນີ້ສາມາດເພີ່ມປະສິດທິພາບໄດ້ໂດຍການຢຸດການເຄື່ອນໄຫວຂອງ enzyme ຫຼື ໂດຍການລວມ laccase ກັບວິທີການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ໃສໄດ້.60ໃນການສຶກສາຄັ້ງນີ້, ການວິເຄາະໂປຣໄຟເອນໄຊມ໌ຂອງສານສະກັດດິບໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳທີ່ສຳຄັນຂອງ laccase ແລະ α-amylase, ໃນຂະນະທີ່ກິດຈະກຳຂອງ pectinase ແລະ xylanase ແມ່ນຕໍ່າຫຼາຍ, ແລະ ກິດຈະກຳຂອງ cellulase ບໍ່ໄດ້ຖືກກວດພົບ. ດັ່ງນັ້ນ, ການຫຼຸດລົງຂອງຄວາມຂຸ່ນ ແລະ ປະລິມານ phenolic ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນຍ້ອນການກະທຳຂອງ laccase, ໃນຂະນະທີ່ການປ່ຽນແປງຂອງຄວາມໜືດອາດຈະເປັນຍ້ອນການກະທຳຂອງ amylase ສ່ວນໜຶ່ງ.
ຕາຕະລາງທີ 1 ສະແດງໃຫ້ເຫັນພາລາມິເຕີທາງກາຍະພາບ ແລະ ເຄມີຂອງນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຄັ້ນສົດໆ ແລະ ຕົວຢ່າງທີ່ຜ່ານການເຄືອບດ້ວຍ laccase. ຜົນໄດ້ຮັບສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຜົນຜະລິດຂອງນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຄັ້ນສົດໆ (71.59%) ຕ່ຳກວ່າຕົວຢ່າງທີ່ຜ່ານການເຄືອບດ້ວຍ laccase (87.34%). ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ສອດຄ່ອງກັບການຄົ້ນພົບຂອງ Pilnik ແລະ Orange.61, ຜູ້ທີ່ຊີ້ບອກວ່າການໃຊ້ເອນໄຊມ໌ໃນການປຸງແຕ່ງໝາກໄມ້ສາມາດເພີ່ມຜົນຜະລິດນ້ຳໝາກໄມ້, ປັບປຸງການກັ່ນຕອງ, ແລະ ໄດ້ຮັບນ້ຳໝາກໄມ້ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງ ແລະ ໃສເພື່ອຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ. ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງຜົນຜະລິດນ້ຳໝາກໄມ້ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນຍ້ອນການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງປະລິມານນ້ຳຕານທີ່ລະລາຍໃນນ້ຳໝາກໄມ້. ໃນລະຫວ່າງການຍ່ອຍສະຫຼາຍດ້ວຍເອນໄຊມ໌ຂອງໝາກໄມ້, ເມໂຊກລີ ແລະ ເພັກຕິນໃນຝາເຊວຂອງຜະລິດຕະພັນຈະຖືກທຳລາຍ ແລະ ປ່ຽນເປັນສານທີ່ລະລາຍເຊັ່ນ: ນ້ຳຕານ ແລະ ກົດທີ່ເປັນກາງ.62.ຄ່າ pH ຂອງນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງດ້ວຍເອນໄຊມ໌ແມ່ນຕໍ່າກວ່າກຸ່ມຄວບຄຸມຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ (P < 0.05), ແລະຄ່າ pH ຂອງທັງສອງກຸ່ມໄດ້ເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາ (ຕາຕະລາງທີ 1). ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນສອດຄ່ອງກັບຜົນໄດ້ຮັບຂອງ Mark et al.63, ຜູ້ທີ່ສັງເກດເຫັນວ່າ pH ຂອງນ້ຳໝາກມ່ວງຫິມະພານຫຼຸດລົງຫຼັງຈາກເກັບຮັກສາຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍຄວາມຮ້ອນ. ການເຊື່ອມໂຊມຂອງເພັກຕິນ ແລະ ການສ້າງກົດກາແລັກຕູໂຣນິກ ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວດ້ວຍເອນໄຊມ໌ອາດຈະເປັນສາເຫດຂອງການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງ pH ໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາ. pH ຂອງຕົວຢ່າງທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍເອນໄຊມ໌ຍັງຄົງຢູ່ລະຫວ່າງ 4.05 ແລະ 4.31 ຕະຫຼອດການເກັບຮັກສາ, ໃນຂະນະທີ່ pH ຂອງນ້ຳໝາກໂປມທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍຄວາມຮ້ອນຢູ່ລະຫວ່າງ 4.12 ແລະ 4.33.
ຄວາມເປັນກົດທັງໝົດ (TA) ຂອງຕົວຢ່າງທັງທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ ແລະ ຕົວຢ່າງທີ່ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ laccase ສະແດງໃຫ້ເຫັນແນວໂນ້ມທີ່ຫຼຸດລົງຕາມເວລາເກັບຮັກສາທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນ (ຕາຕະລາງທີ 1). ການຫຼຸດລົງຂອງຄວາມເປັນກົດແມ່ນຍ້ອນການປ່ຽນກົດອິນຊີໄປເປັນຄາໂບໄຮເດຣດ ຫຼື ປະຕິກິລິຍາຂອງເອນໄຊມ໌, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການຜຸພັງໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສານ້ຳໝາກໄມ້.64ຄວາມເປັນກົດທັງໝົດຂອງນ້ຳໝາກໂປມຄວບຄຸມ ແລະ ຕົວຢ່າງທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍເອນໄຊມ໌ແມ່ນຕໍ່າກວ່ານ້ຳໝາກໄມ້ຊະນິດອື່ນໆ (ນ້ຳໝາກສະຕໍເບີຣີ 0.9%, ນ້ຳໝາກບວບ 2.2%, ນ້ຳໝາກກຸດ 1.0%, ນ້ຳໝາກແອບປຣີຄອດ 2.4%, ນ້ຳໝາກກ້ຽງ 0.8%), ແຕ່ຄ້າຍຄືກັນກັບນ້ຳໝາກໄມ້ຊະນິດອື່ນໆ (ເຊັ່ນ: ນ້ຳໝາກແພ 0.3%).62ຄວາມແຕກຕ່າງເຫຼົ່ານີ້ໃນນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຄັ້ນສົດໆທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວອາດເປັນຍ້ອນປັດໃຈຕ່າງໆເຊັ່ນ: ສະພາບການເຕີບໂຕ, ປັດໄຈທາງພັນທຸກໍາ, ລະດັບຄວາມສຸກ, ແລະ ວິທີການປຸງແຕ່ງ.65ການຫຼຸດລົງຂອງຄວາມເປັນກົດທັງໝົດຂອງນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຄວບຄຸມ ແລະ ນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງດ້ວຍ laccase ແມ່ນສອດຄ່ອງກັບຜົນໄດ້ຮັບທີ່ນຳສະເໜີໂດຍ Singh et al.66ກ່ຽວກັບການຫຼຸດລົງຂອງຄວາມເປັນກົດທັງໝົດຂອງນ້ຳໝາກໂປມ Jin Nuo ຫຼັງຈາກເກັບຮັກສາໄດ້ 74 ມື້. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, Oshmiansky ແລະ Wojdylo67ບໍ່ພົບການປ່ຽນແປງທີ່ສຳຄັນໃດໆໃນຄວາມເປັນກົດຂອງນ້ຳໝາກໂປມເມື່ອສຶກສາຜົນກະທົບຂອງວິທີການເຮັດໃຫ້ກະຈ່າງໃສແບບດັ້ງເດີມ.
ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ນຳສະເໜີໃນຕາຕະລາງທີ 1 ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າຄ່າຂອງແຂງທີ່ລະລາຍທັງໝົດ (TSS) ຂອງນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງດ້ວຍ laccase ສູງກວ່າຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ. ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ສອດຄ່ອງກັບການສຶກສາທີ່ໄດ້ເຜີຍແຜ່. 68ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ຕາຕະລາງທີ 1 ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຄ່າ TSS ຂອງກຸ່ມນ້ຳໝາກໂປມຄວບຄຸມແມ່ນ 9.58 ໃນຈຸດເວລາເລີ່ມຕົ້ນ ແລະ ບັນລຸ 11.05 ໃນຕອນທ້າຍຂອງໄລຍະເວລາເກັບຮັກສາ. ຄ່າເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນຕໍ່າກວ່າຄ່າ TSS ຂອງນ້ຳໝາກໂປມສົດທີ່ລາຍງານໂດຍ Hamid et al.. 69(11.2 ແລະ 11.80 ຕາມລຳດັບ). ຄ່າ TSS ຂອງຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກໂປມທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ laccase ໄດ້ເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ, ເລີ່ມຕົ້ນຈາກ 11.23 ແລະ ບັນລຸ 12.93 ຫຼັງຈາກເກັບຮັກສາໄດ້ສອງອາທິດທີ່ອຸນຫະພູມ 4°C (ຕາຕະລາງທີ 1). ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງ TSS ທີ່ຄ້າຍຄືກັນໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາຍັງໄດ້ສັງເກດເຫັນໃນໝາກໄມ້ປະເພດໝາກນາວ, ໝາກນາວ, ແລະ ໝາກກ້ຽງຫວານ. ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງຂອງແຂງທີ່ລະລາຍທັງໝົດ (TSS) ໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາອາດຈະເປັນຍ້ອນການໄຮໂດຣໄລຊິດຂອງໂພລີແຊກຄາໄຣດ໌ (ແປ້ງ) ໄປເປັນໂມໂນແຊກຄາໄຣດ໌ (ນ້ຳຕານ), ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນເນື່ອງຈາກການຂາດນ້ຳຂອງນ້ຳ, ແລະການເສື່ອມສະພາບຂອງເພັກຕິນໃນນ້ຳໄປເປັນຂອງແຂງທີ່ລະລາຍ. ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງຂອງແຂງທີ່ລະລາຍທັງໝົດ (TSS) ອາດຈະເປັນຍ້ອນການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງນ້ຳຕານທີ່ລະລາຍ, ເຊິ່ງອາດຈະເກີດຂຶ້ນໂດຍການປ່ຽນເພັກຕິນ ຫຼື ເຊລລູໂລສ ໄປເປັນນ້ຳຕານທີ່ລະລາຍໂດຍເພັກຕິນ ຫຼື ເຊລລູໂລສ, ຕາມລຳດັບ, ຫຼື ໂດຍການໄຮໂດຣໄລຊິດຂອງແປ້ງໄປເປັນນ້ຳຕານ, ດັ່ງທີ່ລາຍງານໂດຍ Hamed et al.69.ຜົນກະທົບຂອງ laccase ຕໍ່ຄຸນສົມບັດຂອງນ້ຳໝາກໂປມສາມາດສັງເກດໄດ້ດ້ວຍສາຍຕາ, ຍ້ອນວ່ານ້ຳໝາກໂປມທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງ laccase ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມສາມາດໃນການໄຫຼທີ່ດີກວ່າ ແລະ ຄວາມໜືດຕ່ຳກວ່ານ້ຳໝາກໂປມທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ. ການສັງເກດການນີ້ໄດ້ຖືກບັນທຶກໄວ້ໃນຕາຕະລາງທີ 1; ຄວາມໜືດຂອງຕົວຢ່າງທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງດ້ວຍ enzyme ແມ່ນ 1.87 cP, ໃນຂະນະທີ່ຄວາມໜືດຂອງຕົວຢ່າງຄວບຄຸມແມ່ນ 2.95 cP. ການຫຼຸດລົງທີ່ສຳຄັນຂອງຄວາມໜືດນີ້ອາດຈະເປັນຍ້ອນຄວາມສາມາດໃນການກັກເກັບນ້ຳທີ່ສູງຂຶ້ນຂອງສານທີ່ຄ້າຍຄື pectin ແລະ ການສ້າງໂຄງສ້າງເຄືອຂ່າຍທີ່ສອດຄ່ອງກັນ.
ໃນການສຶກສາຄັ້ງນີ້, ຜົນກະທົບຂອງ laccase ຕໍ່ດັດຊະນີການເກີດສີນ້ຳຕານ (BI) ຂອງນ້ຳໝາກໂປມໄດ້ຖືກສືບສວນໂດຍການວັດແທກການດູດຊຶມທີ່ 420 nm ໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງວັດແທກແສງສະເປກໂຕຣໂຟໂຕມິເຕີ. ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງທີ 1. ໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາ, BI ຂອງຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກໂປມໃນທັງກຸ່ມທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ ແລະ ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວສະແດງໃຫ້ເຫັນແນວໂນ້ມທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນເທື່ອລະກ້າວ. BI ສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນລະດັບຂອງການເກີດສີນ້ຳຕານ ແລະ ສາມາດເປັນທີ່ສຳຄັນຕົວຊີ້ບອກຂອງປະຕິກິລິຍາການເກີດສີນ້ຳຕານທັງທາງເອນໄຊມ໌ ແລະ ບໍ່ແມ່ນທາງເອນໄຊມ໌. ການດູດຊຶມໄດ້ເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາ (P < 0.05). ໃນຕອນທ້າຍຂອງການເກັບຮັກສາ,A420ມູນຄ່າຂອງຕົວຢ່າງນ້ຳໝາກໂປມໃນກຸ່ມຄວບຄຸມ ແລະ ກຸ່ມທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍເອນໄຊມ໌ເພີ່ມຂຶ້ນປະມານ 217% ແລະ 121% ຕາມລຳດັບ (ຕາຕະລາງທີ 1). ຜົນໄດ້ຮັບຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວດ້ວຍເອນໄຊມ໌ສາມາດຫຼຸດຜ່ອນລະດັບການເປັນສີນ້ຳຕານໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບປະມານ 56%. ຜົນໄດ້ຮັບຂອງ Bezerra et al.[19]] ສອດຄ່ອງກັບຜົນໄດ້ຮັບຂອງພວກເຮົາ; ພວກເຂົາໄດ້ໃຊ້ເສັ້ນໃຍ laccase-glutaraldehyde-coconut ເພື່ອເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໂປມມີຄວາມຊັດເຈນຂຶ້ນ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ສີເດີມຂອງມັນຫຼຸດລົງ 61%.
ເຖິງແມ່ນວ່າໂພລີຟີນອນໃນນ້ຳໝາກໄມ້ມີຜົນກະທົບທາງໂພຊະນາການ ແລະ ການປິ່ນປົວໃນທາງບວກຕໍ່ຮ່າງກາຍຂອງມະນຸດ, ແຕ່ພວກມັນຍັງສາມາດປະຕິກິລິຍາກັບໂປຣຕີນ, ເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ຂຸ່ນ, ຕົກຕະກອນ, ຫຼື ຂຸ່ນ, ຊຶ່ງເຮັດໃຫ້ລົດຊາດ ແລະ ກິ່ນຫອມຂອງຜະລິດຕະພັນປ່ຽນແປງ ແລະ ຫຼຸດອາຍຸການເກັບຮັກສາຂອງມັນລົງ.71ຈຸດປະສົງຂອງການສຶກສາຄັ້ງນີ້ແມ່ນເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນປະລິມານສານປະກອບ phenolic ໃນນ້ຳໝາກໂປມຢ່າງປອດໄພໂດຍໃຊ້ laccase ຈາກ Pleurotus ostreatus NRC 620. ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ນຳສະເໜີໃນຕາຕະລາງທີ 1 ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າປະລິມານສານປະກອບ phenolic ທັງໝົດໃນນ້ຳໝາກໂປມທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງ laccase ໄດ້ຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍກ່ອນການເກັບຮັກສາທີ່ອຸນຫະພູມ 4°C. ນອກຈາກນັ້ນ, ປະລິມານສານປະກອບ phenolic ທັງໝົດຍັງຫຼຸດລົງໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາໃນທັງສອງຕົວຢ່າງທີ່ໄດ້ສຶກສາ (ຕາຕະລາງທີ 1). ການຄົ້ນຄວ້າໂດຍ Sandri et al.72ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່ານ້ຳໝາກໂປມທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງດ້ວຍເອນໄຊສາມາດຮັກສາກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະ ແລະ ປະລິມານສານປະກອບຟີນໍລິກໄວ້ໄດ້. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຜົນຂອງການສຶກສາໂດຍ Lettera ແລະ ຄະນະ.73ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປິ່ນປົວນ້ຳສົ້ມດ້ວຍເຊື້ອລາ laccase ສາມາດຫຼຸດຜ່ອນປະລິມານຂອງສານປະກອບ phenolic ໃນມັນໄດ້ເຖິງ 45%.
ສານປະກອບຟີນໍລິກໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າມີຄຸນສົມບັດເຊັ່ນ: ການກຳຈັດອະນຸມູນອິດສະລະ, ການຫຼຸດຜ່ອນ ແລະ ການດັບອົກຊີເຈນດ່ຽວ, ການໂອນອະຕອມໄຮໂດເຈນ, ແລະ ການບໍລິຈາກເອເລັກຕຣອນໃຫ້ກັບອະນຸມູນອິດສະລະ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ພວກມັນເປັນສານຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະທີ່ມີປະສິດທິພາບ.74ດັ່ງນັ້ນ, ໃນການສຶກສາຄັ້ງນີ້, ວິທີການທີ່ອີງໃສ່ DPPH ແລະ FRAP ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອປະເມີນຜົນກະທົບຂອງ laccase ຕໍ່ກິດຈະກໍາຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະຂອງນ້ໍາຫມາກໂປມທີ່ເກັບໄວ້ໃນຕູ້ເຢັນເປັນເວລາ 14 ມື້ (ຕາຕະລາງທີ 2). ທັງສອງວິທີສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງກິດຈະກໍາຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາ, ເຊິ່ງອາດຈະເປັນຍ້ອນການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງສານປະກອບ phenolic ອິດສະຫຼະ ຫຼື ການສ້າງຜະລິດຕະພັນປະຕິກິລິຍາ Maillard (MRPs), ໂດຍຜະລິດຕະພັນປະຕິກິລິຍາ Maillard ອາດຈະເປັນສາເຫດຂອງການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງກິດຈະກໍາຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະ.75ປະຕິກິລິຍາການເກີດສີນ້ຳຕານທີ່ບໍ່ແມ່ນເອນໄຊມ໌ (ລວມທັງການເຊື່ອມໂຊມຂອງກົດ ascorbic, ປະຕິກິລິຍາ Maillard, ແລະ ການເຊື່ອມໂຊມຂອງນ້ຳຕານດ້ວຍກົດ) ຜະລິດເມັດສີນ້ຳຕານ (melanoidins). ຜະລິດຕະພັນການເຊື່ອມໂຊມຂອງກົດ ascorbic ລະດັບປານກາງ ແລະ ຜະລິດຕະພັນການເຊື່ອມໂຊມຂອງນ້ຳຕານ (ເຊັ່ນ: ສານປະກອບ carbonyl) ສາມາດປະຕິກິລິຍາກັບກົດ amino ຜ່ານປະຕິກິລິຍາ Maillard.76ເຖິງແມ່ນວ່າການເກີດສີນ້ຳຕານຂອງໝາກໄມ້ ແລະ ຜັກໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາໄດ້ຖືກສຶກສາຢ່າງກວ້າງຂວາງ, ແຕ່ຄວາມເຂົ້າໃຈຂອງພວກເຮົາກ່ຽວກັບປະຕິກິລິຍາເຫຼົ່ານີ້ຍັງຄົງຈຳກັດ.77ເມື່ອປຽບທຽບກັບວິທີການ FRAP, ນ້ຳໝາກໂປມທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ laccase ສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະທີ່ຕ່ຳກວ່າຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໂດຍວິທີການ DPPH (ຕາຕະລາງທີ 2), ແລະກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະຂອງຕົວຢ່າງທັງໝົດໄດ້ເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍເມື່ອເວລາເກັບຮັກສາເພີ່ມຂຶ້ນ. ສອງວິທີການທີ່ແຕກຕ່າງກັນສຳລັບການກຳນົດກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະໄດ້ຖືກນຳໃຊ້ໃນການສຶກສານີ້ເພາະວ່າຫຼັກການຂອງພວກມັນແຕກຕ່າງກັນ. ວິທີການ DPPH ວັດແທກຄວາມສາມາດໃນການກຳຈັດອະນຸມູນອິດສະລະ, ໃນຂະນະທີ່ວິທີການ FRAP ວັດແທກຄວາມສາມາດໃນການຫຼຸດຜ່ອນໄອອອນທາດເຫຼັກ. ດັ່ງນັ້ນ, ຈຶ່ງແນະນຳໃຫ້ໃຊ້ຫຼາຍວິທີສຳລັບການກຳນົດກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະເພື່ອເຂົ້າໃຈກິດຈະກຳຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະຂອງຕົວຢ່າງທີ່ໄດ້ສຶກສາໄດ້ດີຂຶ້ນ.78
ໜຶ່ງໃນການຄົ້ນພົບທີ່ສຳຄັນຂອງການສຶກສາຄັ້ງນີ້ແມ່ນວ່າ ເຊື້ອລາ *Pleurotus ostreatus* laccase NRC 620 ສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳທີ່ດີທີ່ສຸດທີ່ 70°C ແລະ pH 3.0. ເມື່ອປຽບທຽບກັບເຊື້ອລາ laccases ເຊື້ອລາອື່ນໆທີ່ນິຍົມໃຊ້ສຳລັບການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ໃສຂຶ້ນ, ເຊັ່ນ: *Trametes versicolor* ແລະ *Ganoderma lucidum* laccases, *P. ostreatus* NRC 620 ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມໝັ້ນຄົງທາງຄວາມຮ້ອນທີ່ສູງກວ່າ ແລະ pH ເປັນກົດຫຼາຍກວ່າ. ເຊື້ອລາຈາກ *Trametes versicolor* ແລະ *Ganoderma lucidum* ມັກຈະສະແດງໃຫ້ເຫັນກິດຈະກຳທີ່ດີທີ່ສຸດໃນລະດັບ 50-60°C ແລະ ຢູ່ທີ່ຄ່າ pH ລະຫວ່າງ 3.5 ແລະ 5.0. ຄວາມແຕກຕ່າງນີ້ອາດຈະປະກອບສ່ວນເຂົ້າໃນການປັບປຸງປະສິດທິພາບການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ໃສຂຶ້ນ, ໂດຍສະເພາະສຳລັບນ້ຳໝາກໄມ້ທີ່ເປັນກົດ ບ່ອນທີ່ຄວາມໝັ້ນຄົງຢູ່ທີ່ຄ່າ pH ຕ່ຳກວ່າແມ່ນມີຄວາມສຳຄັນຫຼາຍ. ລັກສະນະທີ່ເປັນເອກະລັກຂອງ *P. ເມື່ອປຽບທຽບກັບເຊື້ອລາ laccases ເຊື້ອລາອື່ນໆທີ່ໄດ້ຮັບການສຶກສາ, *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມສາມາດໃນການເຮັດວຽກຢ່າງມີປະສິດທິພາບພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ທ້າທາຍກວ່າ. ອຸນຫະພູມກິດຈະກຳທີ່ດີທີ່ສຸດທີ່ສູງກວ່າຂອງມັນຊີ້ໃຫ້ເຫັນເຖິງຂໍ້ໄດ້ປຽບທີ່ອາດເປັນໄປໄດ້ໃນການນຳໃຊ້ໃນອຸດສາຫະກຳ, ເຊັ່ນ: ອັດຕາການປະຕິກິລິຍາທີ່ໄວຂຶ້ນ ແລະ ການປົນເປື້ອນຂອງຈຸລິນຊີທີ່ຫຼຸດລົງ. ຄ່າ pH ຕ່ຳຂອງມັນ, ເຊິ່ງເໝາະສົມກັບລັກສະນະທີ່ເປັນກົດຂອງນ້ຳໝາກໄມ້ຫຼາຍຊະນິດ, ອາດຈະເປັນປະໂຫຍດໃນຂະບວນການເຮັດໃຫ້ນ້ຳໝາກໄມ້ມີຄວາມກະຈ່າງໃສ. ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນການສຳຫຼວດຕື່ມອີກສຳລັບການນຳໃຊ້ໃນຂອບເຂດກ້ວາງ, ເຮັດໃຫ້ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ເປັນທາງເລືອກທີ່ເປັນໄປໄດ້ສຳລັບແຫຼ່ງເຊື້ອລາ laccase ແບບດັ້ງເດີມ. ເມື່ອປຽບທຽບກັບການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາ, ພວກເຮົາພົບວ່າອຸນຫະພູມທີ່ດີທີ່ສຸດແມ່ນ 60°C ແລະ pH ທີ່ດີທີ່ສຸດແມ່ນ 3.0. ຫຼັງຈາກປະຕິກິລິຍາທີ່ 60°C ເປັນເວລາ 80 ນາທີ, *Ganoderma lucidum* laccase ຍັງຄົງຢູ່.46% ຂອງກິດຈະກຳຂອງມັນ.79 ອີງຕາມ Kurniawati ແລະ Nicelle80, ເອນໄຊມ໌ *ເຫັດຫຼິນຈາງ* ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໝັ້ນຄົງທີ່ດີເລີດຫາປານກາງທີ່ອຸນຫະພູມ 25°C ແລະຄ່າ pH ຕັ້ງແຕ່ 5.0 ຫາ 8.0, ແລະຄວາມໝັ້ນຄົງທີ່ pH 6.0 ແລະອຸນຫະພູມຕັ້ງແຕ່ 10 ຫາ 30°C. ໃນການສຶກສາຄັ້ງນີ້, ພວກເຮົາພົບວ່າ pH ແລະອຸນຫະພູມທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບກິດຈະກຳຂອງເອນໄຊມ໌ສຳລັບ *Pleurotus ostreatus* ແມ່ນ 3.0 ແລະ 70°C ຕາມລຳດັບ. ຫຼັງຈາກການຟັກຢູ່ທີ່ 40°C ແລະ 50°C ເປັນເວລາສອງຊົ່ວໂມງ, ເອນໄຊມ໌ຍັງຄົງຮັກສາກິດຈະກຳໄວ້ໄດ້ 68.33% ແລະ 59.61% ຕາມລຳດັບ. ນອກຈາກນັ້ນ, Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງກິດຈະກຳສູງໃນຊ່ວງອຸນຫະພູມທີ່ກວ້າງຕັ້ງແຕ່ 50°C ຫາ 80°C, ເກືອບບັນລຸກິດຈະກຳສູງສຸດ (69%–98%), ໂດຍມີກິດຈະກຳສູງສຸດທີ່ສັງເກດເຫັນຢູ່ທີ່ 70°C.
ສະຫຼຸບແລ້ວ, ເຫັດນາງລົມ laccase NRC620, ທີ່ໄດ້ຮັບພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂຄົງທີ່, ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງກິດຈະກໍາ ແລະ ຄວາມໝັ້ນຄົງທີ່ດີທີ່ສຸດໃນທົ່ວເງື່ອນໄຂ pH ແລະ ອຸນຫະພູມຕ່າງໆ, ສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມໝັ້ນຄົງທີ່ດີກວ່າເມື່ອທຽບກັບແຫຼ່ງເອນໄຊອື່ນໆ. ການເພີ່ມ 10 mM MgSO₄ ແລະ CuSO₄ ເພີ່ມກິດຈະກໍາຂອງເອນໄຊປະມານ 21% ແລະ 35% ຕາມລໍາດັບ. ເມື່ອປຸງແຕ່ງເປັນນ້ໍາຫມາກໂປມ, ເອນໄຊໄດ້ຫຼຸດຜ່ອນ pH ແລະ ຄວາມໜືດ, ໃນຂະນະທີ່ປະລິມານ phenolic ຫຼຸດລົງພຽງເລັກນ້ອຍໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາ.
ຜົນໄດ້ຮັບຢືນຢັນເຖິງທ່າແຮງຂອງ laccase ໃນອຸດສາຫະກໍາອາຫານ, ໂດຍສະເພາະໃນການເຮັດໃຫ້ເຄື່ອງດື່ມມີຄວາມກະຈ່າງໃສ. ໂດຍການແຍກສານປະກອບ phenolic ໂດຍສະເພາະ, laccase ບໍ່ພຽງແຕ່ຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຂຸ່ນ ແລະ ປັບປຸງຄວາມກະຈ່າງໃສເທົ່ານັ້ນ ແຕ່ຍັງຮັກສາຄຸນນະພາບຂອງນ້ໍາໝາກໄມ້ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການເຮັດວຽກທີ່ບໍ່ຮຸນແຮງ. ບໍ່ເຫມືອນກັບຕົວແທນເຮັດໃຫ້ມີຄວາມກະຈ່າງໃສແບບດັ້ງເດີມເຊັ່ນ: gelatin, bentonite, ແລະ silica gel, laccase ບໍ່ສ້າງສິ່ງເສດເຫຼືອ ຫຼື ເອົາກິ່ນຫອມທີ່ໜ້າພໍໃຈອອກຈາກເຄື່ອງດື່ມ, ເຮັດໃຫ້ມັນເປັນທາງເລືອກທີ່ເປັນມິດກັບສິ່ງແວດລ້ອມ ແລະ ຍືນຍົງກວ່າ. ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ເມື່ອປຽບທຽບກັບ enzymes ແລະ ວິທີການກັ່ນຕອງອື່ນໆ, laccase ສະເໜີວິທີແກ້ໄຂທີ່ເປົ້າໝາຍ ແລະ ມີປະສິດທິພາບດ້ານຄ່າໃຊ້ຈ່າຍໂດຍບໍ່ມີການຫຼຸດຜ່ອນຄຸນນະພາບຂອງຜະລິດຕະພັນ.
Kyomuhimbo, HD ແລະ Brink, HG. ການນຳໃຊ້ ແລະ ຍຸດທະສາດການເຮັດໃຫ້ບໍ່ສາມາດເຄື່ອນທີ່ຂອງ laccases ທີ່ມີທອງແດງໄດ້; ບົດວິຈານ. Heliyon 9, e13156 (2023).
ເວລາໂພສ: ວັນທີ 15 ທັນວາ 2025